菌株怎麼活化?樣品要求:因為矽膠闆是弱酸性的,對酸不穩定的化合物盡量避免爬大闆;對空氣,水,有機溶劑穩定; 低沸點的溶劑裡要好溶;最好有紫外吸收;極性不能太大(至少展開劑能爬起來),今天小編就來聊一聊關于菌株怎麼活化?接下來我們就一起去研究一下吧!
樣品要求:因為矽膠闆是弱酸性的,對酸不穩定的化合物盡量避免爬大闆;對空氣,水,有機溶劑穩定; 低沸點的溶劑裡要好溶;最好有紫外吸收;極性不能太大(至少展開劑能爬起來)。
上樣:盡量少的溶劑溶解樣品,最好是易揮發的,二氯甲烷最常用,如果不溶可以加幾滴甲醇促溶。可以用一次性滴管塞棉花後剪成毛筆狀上樣,每個人的辦法都不同,小編就是這麼弄的,順便練練毛筆字。上樣時也最好像寫毛筆字一樣一氣呵成,這樣跑出來的帶比較均勻。如樣品溶液太多需要上兩遍樣,先用吹風機吹幹溶劑後再上樣。
跑闆:展開劑的選擇,先用小闆爬樣,具體怎麼爬小闆,請回看往期文章(TLC薄層層析技術),選到合适的展開劑後,配好溶劑爬大闆,由于大闆和小闆由細微的差别,大闆展開劑的極性可以稍微比小闆展開劑的極性大一點,一樣的話也問題不大。跑闆最好要跑到快頂端1cm左右,充分展開樣品,切記不要跑過,跑過的話,極性小的點可能會被展開劑沖都一起,而極性大的點雖然不會沖到上面,但會變散,不容易判斷色帶的邊緣。
檢測:産品的判斷,通過極性大緻判斷哪幾個色帶可能是産品,然後每個色帶可以先刮一點,碾碎,加甲醇溶解,過濾送LCMS檢測判斷。
刮闆:判斷好色帶後,在紫外燈下,用鉛筆描好熒光帶,開始刮闆。帶好口罩很重要,小編是用美工刀刮的,刮不幹淨的可以用小闆刮可以刮幹淨。
洗脫:挂好的矽膠,量少的話,可以隔着稱量紙用試管擀碎。量多的話,直接裝到自封袋裡面随便蹂躏,直到成粉末為止。粉末狀的矽膠樣品的洗脫,大部分人是直接加溶劑泡出來。但小編用的是,把矽膠粉直接裝到柱子(有底層砂芯的那種)裡,上層鋪一薄薄的石英砂,直接像過柱子一樣在上層加溶劑壓出來,這種方法的好處就是,對于溶解性不好的樣品可以快速洗出,用相對較少的溶劑洗出産品。加入溶劑洗脫的時候可以随時點闆看産品是否已經完全洗出。
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