核酸加熱到一定溫度就會兩條鍊分開,讓總核酸中有一半的核酸兩條鍊都分開的溫度就是核酸的退火溫度。
退火溫度是指引物和模闆結合時候的溫度參數,當百分之50的引物和互補序列表現為雙鍊DNA分子時的溫度。它是影響PCR特異性的較重要因素。在理想狀态下,退火溫度足夠低,以保證引物同目的序列有效退火, 同時還要足夠高,以減少非特異性結合。
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